Ludzki wirus niedoboru odporności typu 1 w nasieniu mężczyzn otrzymujących wysoce aktywną terapię przeciwretrowirusową czesc 4

Próbki krwi i nasienia od dwóch zdrowych mężczyzn służyły jako kontrole negatywne. Drugi zestaw próbek uzyskano od Pacjentów 3 i 4 dwa do trzech miesięcy po pierwszym zestawie. Charakterystykę siedmiu mężczyzn przedstawiono w tabeli 1. Poziomy RNA HIV-1 w osoczu i płynie nasiennym tych mężczyzn wynosiły poniżej 50 kopii na mililitr, a zatem były znacznie niższe niż poziomy u mężczyzn z nieleczonymi zakażeniami HIV-1. którzy byli oceniani w tym samym teście (od 1500 do 75 000 kopii na mililitr płynu nasiennego). Wyniki te sugerują, że u naszych pacjentów wysoce aktywna terapia antyretrowirusowa hamowała replikację wirusa nie tylko w krwioobiegu, ale także w drogach rodnych. Jednak wirusowe DNA związane z komórkami wykryto w komórkach jednojądrzastych krwi obwodowej od wszystkich mężczyzn (Figura 1). Liczba kopii DNA gag HIV-1 wynosiła od 5 do 40 na milion jednojądrzastych komórek krwi obwodowej.
Tabela 2. Tabela 2. Genotypy i fenotypy HIV-1 z komórek jednojądrzastych krwi obwodowej i komórek nasiennych. Związane z komórkami prowirusowe DNA wykryto również w komórkach nasiennych od czterech mężczyzn (Figura i Tabela 1). Liczba kopii DNA gag HIV-1 wynosiła od mniej niż 5 do 90 na milion komórek nasiennych. Analiza sekwencji regionu pętli V3 gp120 wykazała, że prowirusowy DNA nie był wynikiem zanieczyszczenia typowymi szczepami laboratoryjnymi, jak analizowano przez przeszukanie bazy danych GenBank (tabela 2) (i danych nie pokazano). U dwóch mężczyzn (Pacjenci 3 i 4) poziomy prowirusowego DNA w komórkach nasiennych i jednojądrzastych komórkach krwi obwodowej zbadano ponownie dwa do trzech miesięcy po pierwszej analizie. Wystąpił niewielki spadek poziomu prowirusowego DNA w komórkach nasiennych w Pacjentach 4. Pacjent 3 w żadnym przypadku nie miał wykrywalnego prowirusowego DNA w komórkach nasiennych.
Odzyskiwanie kompetentnego pod względem replikacji wirusa HIV-1
Figura 2. Figura 2. Kinetyka wzrostu kompetentnego do replikacji HIV-1 z komórek słuchowych. Około 3 miliony świeżych komórek nasienia od mężczyzn zakażonych HIV-1 inkubowano przez 24 godziny z 2 milionami limfocytów krwi obwodowej od zdrowych osobników po zubożeniu limfocytów T CD8 i stymulacji fitohemaglutyniną i interleukiną-2. Mieszaniny komórek następnie przemyto i hodowano w obecności interleukiny-2 (10 U na mililitr) przez sześć tygodni. Każdego tygodnia połowę komórek zastępowano 2 milionami leczonych limfocytów krwi obwodowej od zdrowych osobników, a supernatanty analizowano pod kątem antygenu p24 HIV-1 za pomocą testu ELISA. Przeanalizowano dwie próbki z każdej hodowli.
Replikacyjny HIV-1 odzyskano z limfocytów krwi obwodowej trzech mężczyzn i komórek nasiennych z dwóch z trzech (Tabela i Figura 2). W Patencie 4, kompetentna pod względem replikacji HIV-1 została odzyskana z obu limfocytów krwi obwodowej i komórek nasiennych dwukrotnie. Analizy sekwencji w pętli V3 regionu gp120 otoczki wirusowej z wykorzystaniem bazy danych GenBank wskazały, że wirusy te były pierwotnymi izolatami, a nie szczepami laboratoryjnymi powodującymi zanieczyszczenie (tabela 2) (i dane nie pokazane). Sekwencje wirusowe różniły się między tymi trzema mężczyznami, wykazując w ten sposób, że próbki nie były zanieczyszczone krzyżowo
[więcej w: alprazolam, bromazepam, Białkomocz ]
[podobne: Skoki tandemowe, kabiny toaletowe, cefepim ]
[hasła pokrewne: pokrzywka objawy, polipektomia, porażenie piorunem ]