Ludzki wirus niedoboru odporności typu 1 w nasieniu mężczyzn otrzymujących wysoce aktywną terapię przeciwretrowirusową

Transmisja seksualna odgrywa główną rolę w rozprzestrzenianiu się ludzkiego wirusa niedoboru odporności typu (HIV-1). Nasienie zarażonych mężczyzn może zawierać wysoki poziom HIV-1, a wirusy zakaźne można odzyskać z komórek nasiennych lub płynu nasiennego od tych mężczyzn.1-4 Komórki nasienne to mieszanina plemników, prekursorów komórek płciowych, limfocytów T, makrofagów, a komórki nabłonka i prowirusowy DNA HIV-1 wykryto w kilku typach tych komórek.4-8 Poziom RNA HIV-1 w płynie nasiennym można również skorelować z poziomem w osoczu, a leczenie przeciwretrowirusowe zmniejsza poziomy tylko w osoczu, ale także w płynie nasiennym.9,10 Często występują znaczące różnice w miano wirusa i sekwencjach wirusowych między nasieniem a krwią obwodową, co sugeruje, że replikacja HIV-1 może być podzielona na komórki in vivo. Ostatnio terapia kombinacjami leków przeciwretrowirusowych, określana jako wysoce aktywna terapia antyretrowirusowa, spowodowała zahamowanie RNA HIV-1 w osoczu poniżej granic wykrywalności wielu układów testowych i zwiększyła przeżywalność wielu zakażonych HIV-1 pacjenci. 13,14 U tych pacjentów obciążenie wirusowe w tkankach limfoidalnych jest dramatycznie zmniejszone, 15,16, ale DNA prowirusowe można wciąż wykryć w spoczynkowych limfocytach T CD4 we krwi obwodowej, a wirus zdolny do replikacji można odzyskać z tych komórek. , co wskazuje, że komórki mogą być rezerwuarem do replikacji wirusa.17-19 HIV-1 może replikować się w wielu typach komórek i wielu miejscach w ciele, ale czy tkanki i komórki inne niż spoczynkowe limfocyty CD4 T w krwi obwodowej nie zawierają replikacji- Właściwy wirus u pacjentów otrzymujących długoterminowo wysoce aktywną terapię przeciwretrowirusową nie jest znany. Zbadaliśmy, czy prowirusowy DNA i wirus zdolny do replikacji są obecne w komórkach nasiennych u zakażonych HIV-1 mężczyzn, którzy otrzymali wysoce aktywną terapię przeciwretrowirusową i u których nie wykryto wirusowego RNA w osoczu.
Metody
Osoby badane
Przebadaliśmy siedmiu mężczyzn z zakażeniem wirusem HIV-1, którzy mieli poziom RNA HIV-1 w osoczu poniżej 400 kopii na mililitr przy pomiarze w teście odwrotnej transkryptazy-reakcji łańcuchowej polimerazy (RT-PCR) trzykrotnie w odstępie co najmniej jednego miesiąca. . Mężczyźni mieli poziom RNA HIV-1 w surowicy przed rozpoczęciem leczenia wynoszący co najmniej 1000 kopii na mililitr i stosowali wysoce aktywną terapię przeciwretrowirusową przez 5 do 41 miesięcy. Zostali oni zidentyfikowani spośród kohorty ponad 400 mężczyzn z zakażeniem HIV-1, którzy byli leczeni w naszych klinikach. Około czterech innych mężczyzn, którzy spełnili kryterium kwalifikowalności, odmówiło udziału w badaniu. W dniach, w których próbki krwi obwodowej i nasienia uzyskano do badania, poziomy RNA HIV-1 w osoczu u wszystkich siedmiu mężczyzn wynosiły poniżej 50 kopii na mililitr, jak zmierzono za pomocą techniki czułej RT-PCR opisanej poprzednio. Próbki nasienia zebrano przez masturbację do czystych pojemników. Wszystkie próbki zostały przetworzone w ciągu dwóch godzin po pobraniu. Protokół badania został zatwierdzony przez instytucjonalną komisję odwoławczą uczelni, a wszyscy mężczyźni wyrazili pisemną zgodę.
Ilościowe analizy DNA i RNA HIV-1
Komórki krwi obwodowej oddzielano od osocza przez nieciągły wirowanie Ficoll przy 1000 xg przez 20 minut w 4 ° C
[hasła pokrewne: oprogramowanie stomatologiczne, Corsodyl, wdrożenia magento ]
[więcej w: hologramy na legitymację studencką, wiercenie w żelbecie, cyprofloksacyna ]
[więcej w: pęcherzowe oddzielanie się naskórka, pecherzyca, pekan ]