przychodnia batalionów chłopskich szczecin usg

Ostatnio nasza grupa poinformowała o wyizolowaniu neurowirulentnego szczepu małpiego wirusa niedoboru odporności (SIV) afrykańskiego lentiwirusa prymasa (sm), SIVsm804E, który wywoływał neuropatologię u 83% zakażonych makaków rezusa, gdy zwierzęta z restrykcyjnymi allelami MHC lub TRIM zostały wyeliminowane z kohorta (14, 15). Ten izolat wirusa wytworzono przez sekwencyjne przejście nienowotworowego wirusa rodzicielskiego SIVsmE543-3 przez makaki rezus. Dlatego porównaliśmy SIVsmE543-3 i SIVsm804E, aby spróbować określić determinanty wirusowe neurowirulencji. Mutacje nagromadzone w wirusowym dodatkowym białkowym czynniku negatywnym (nef) i długich końcowych powtórzeniach (LTR) zostały najpierw ocenione, ponieważ istnieją doniesienia sugerujące, że mutacje w tych regionach mogą nadawać neurotropizm i poprawiać replikację w OUN (16. 18). Dodatkowe doniesienia sugerują, że Nef może wywierać bezpośrednią toksyczność w niektórych populacjach komórek w OUN, takich jak astrocyty (19, 20). Zatem chimeryczny klon SIVsmE543-3 z częścią 3. gp41 ogon cytoplazmatyczny, nef i 3 a-LTR z SIVsm804E został stworzony w celu zbadania wpływu mutacji nef i LTR in vitro. Sugerowano, że makrofagi / mikrogleje są głównymi celami zakażenia HIV-1 / SIV i replikacji w OUN; dlatego tropizm makrofagów i replikacja wirusa w komórkach szpikowych wydają się mieć kluczowe znaczenie dla rozwoju zaburzeń neurologicznych (21). Jest to dodatkowo poparte faktem, że większość izolatów HIV-1 z OUN od osób z zaburzeniami neurokognitywnymi jest zwrotnikiem makrofagów (22). Istotnie, główną różnicą między SIVsmE543-3 i SIVsm804E jest to, że ten drugi wirus replikuje się sprawniej w makrofagach pochodzących z monocytów (MDM) (15). Ponieważ tropizm makrofagów jest silnie uzależniony od liczby miejsc glikozylacji na glikoproteinie otoczki (Env), głównie w gp120 (23), postawiono hipotezę, że mutacje wykryte w nef i LTR SIVsm804E będą miały minimalny wpływ na replikację SIVsmE543-3 w MDM . Jednakże chimeryczny klon nieoczekiwanie wykazywał zwiększoną replikację w makrofagach. W niniejszym badaniu ustaliliśmy region Env SIVsm804E, aby był odpowiedzialny za zapewnienie zwiększonej replikacji wirusa w makrofagach. W niniejszym raporcie stwierdzamy, że 4 substytucje aminokwasowe na ognisku cytoplazmatycznym gp41 są związane ze zwiększoną replikacją w MDM i są również związane ze zwiększonym antagonizmem wirusowym przeciwko antygenowi 2 komórki zrębowej BM restrykcyjnego gospodarza (BST-2), co sugeruje BST-2. może odgrywać ważną rolę w ograniczaniu replikacji wirusa w OUN. Wyniki SIVsmE543-3 z 3. gp41 / nef / LTR z neurowirulentnego SIVsm804E pokazuje ulepszoną replikację w MDM. Aby zbadać wpływ mutacji w nef i LTR na replikację SIVsmE543, SIVsm804E CL4E4, CL6E6 i CL7E7 wygenerowano przez wprowadzenie 3. region gp41 / nef / LTR z SIVsm804E do odpowiedniego regionu SIVsmE543-3 (Figura 1A). SIVmac239, wirus, który replikuje się głównie w PBMC, ale nie MDM, zastosowano jako kontrolę. PBMC i MDM zakażono tymi chimerycznymi wirusami i monitorowano aktywność odwrotnej transkryptazy (RT) supernatantu hodowli w celu zmierzenia poziomu replikacji wirusa. Oryginalne SIVsm804E i SIVsmE543-3 wykazywały porównywalną replikację w PBMC, chociaż SIVsm804E wykazywał nieco wyższą aktywność RT w 12 dniu po zakażeniu. Chimeryczne klony wykazały porównywalne poziomy replikacji z SIVsmE543-3. SIVmac239 wykazał silną replikację w PBMC z opóźnioną szczytową replikacją wirusa w porównaniu z wariantami SIVsmE543. W przeciwieństwie do tego, podczas gdy SIVsm804E wykazał silną replikację w MDM, SIVsmE543-3 wykazał niski poziom replikacji, zgodny z naszym poprzednim raportem (15). Zgodnie z oczekiwaniami, SIVmac239 nie wykazał mierzalnej replikacji w MDM
[więcej w: gimnazjum lubasz, pecherzyca, polipektomia ]